摘要：
目的 观察小檗碱对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)耐药性的影响,并探讨可能的机制.方法 取对数期耐 5-FU的人舌鳞癌CAL27细胞(human tongue squamous cell carcinoma CAL27 cells resistant to 5-FU,CAL27/5-FU),将微小核糖核酸(micro ribonucleic acid,miR)-30a抑制质粒miR-30a inhibitor转染至CAL27/5-FU细胞上,将其随机分为inhibitor组和联合组,inhibitor组常规培养,联合组加入40 μg·mL-1小檗碱进行培养;另取对数期CAL27/5-Fu细胞分为空白组和小檗碱组,空白组常规培养,小檗碱组加入40 μg·mL-1小檗碱进行培养.用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞的增殖抑制率;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞miR-30a的表达水平;双染法检测细胞的凋亡率;双荧光素酶实验验证miR-30a与三结构域蛋白31(tripartite motif-containing protein 31,TRIM31)的靶向关系;免疫印迹法(Western blotting)检测细胞TRIM31蛋白的表达情况.结果 与空白组比较,小檗碱组的增殖抑制率、miR-30a的表达水平和凋亡率均升高,TRIM31蛋白的表达量降低(P<0.05),inhibitor组的增殖抑制率、miR-30a的表达水平和凋亡率均降低,TRIM31蛋白的表达量升高(P<0.05);与小檗碱组比较,联合组的增殖抑制率、miR-30a的表达水平和凋亡率均降低,TRIM31蛋白的表达量升高(P<0.05);与inhibitor组比较,联合组的增殖抑制率、miR-30a的表达水平和凋亡率均升高,TRIM31蛋白的表达量降低(P<0.05).双荧光素酶实验结果显示,TRIM31是miR-30a的靶基因,两者的结合位点为TRIM31的3'-UTR片段.结论 小檗碱可逆转OSCC细胞的5-FU耐药性,促进细胞凋亡,其作用机制可能是通过上调miR-30a的表达来进一步靶向下调TRIM31的表达.
