目的探讨25-羟维生素D、高迁移率族蛋白B1在手足口病患儿表达及临床意义。方法随机选取2017年12月1日-2019年11月1日某院101例HFMD患儿作为观察组,同期选取93例健康小儿作为对照组。统计2组病情程度、生存情况、有无心肌损伤、患者血清25（OH）D、HMGB1,分析各血清指标与病情程度、心肌损伤相关性,绘制受试者曲线分析各血清指标单一及联合诊断HFMD价值。结果观察组血清HMGB1水平高于对照组,25（OH）D水平低于对照组（P<0.05）;ROC显示,两者联合诊断HFMD价值优于血清25（OH）D、HMGB1单一诊断,诊断敏感度及特异度分别为68.32%、91.40%;观察组危重型者血清HMGB1水平高于重症型者、普通型者,25（OH）D水平低于重症型者、普通型者（P<0.05）;观察组有心肌损伤者血清HMGB1水平高于无心肌损伤者25（OH）D水平低于无心肌损伤者（P<0.05）;HFMD患儿病情程度、心肌损伤与血清HMGB1水平（r1=0.713,r2=0.655）呈正相关,与25（OH）D水平（r3=-0.724,r4=-0.702）呈负相关（P<0.05）;观察组生存者血清HMGB1水平低于死亡者,25（OH）D水平高于死亡者（P<0.05）。结论 25（OH）D、HMGB1在HFMD患儿中呈高表达,与病情程度、心肌损伤、预后有关,有利于临床评估病情指导治疗。