摘要:
目的:应用自身抗体技术从乳腺癌cDNA T7噬菌体展示文库筛选乳腺肿瘤相关抗原。方法:运用生物淘洗富集技术、噬菌斑转印分析和免疫化学检测方法,用正常人和乳腺癌病人血清从一个乳腺癌cDNA T7噬菌体文库中筛选肿瘤相关噬菌体克隆。通过PCR和测序的方法分析开放阅读框架内的序列,BLAST比对识别出这些噬菌体表达蛋白。然后用酶联免疫吸附(ELISA)的方法对87个乳腺癌病人和87个正常人血清样品,检测每一个开放阅读框架内的噬菌体表达蛋白的自身抗体。用逻辑回归模型和留一交叉验证评估单个标志物和多标志物联合诊断的准确率。结果:筛选得到3个开放阅读框架之内的噬菌体克隆ASB-9,SERAC-1和RELT。用87份乳腺癌病人血清和87份正常人血清对这3个噬菌体表达蛋白进行验证,逻辑回归模型联合检测的敏感性达到80%,特异性达到100%;留一交叉验证3者联合的预测值敏感性和特异性分别达到76.5%和82.4%。ROC曲线分析和留一法都表明多个标志物联合检测的价值要高于单标志物,预示着多标志物联合在诊断中的重要性。结论:对乳腺癌来说,血清自身抗体是其早期检测和诊断的一种有效方法,而且多抗体联合应用可实现更高的诊断准确率。