摘要:
目的探讨Cdx1在大鼠胚胎肛门直肠发育过程中所发挥的作用。方法应用乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)致畸Wistar孕鼠24只肛门直肠畸形动物模型,免疫组织化学染色、RT-PCR和western blot方法分别研究Cdx1 mRNA和Cdx1蛋白在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠的表达。结果 Cdx1在大鼠发育过程中正常胚胎泄殖腔中表达,在第13天和第14天主要表达于尿直肠隔和泄殖腔膜,胚胎第15天时在尿直肠隔与泄殖腔膜融合处Cdx1表达较强,第16天时肛膜破裂,肛门直肠与外界相通,Cdx1在直肠黏膜层表达。Cdx1在ARM胎鼠泄殖腔和直肠黏膜层表达较弱或呈现阴性表达。Western blot和RT-PCR半定量检测结果:在发育期的后肠中Cdx1和Cdx1mRNA的表达表现出时间依赖性的特点:在肛门形成的关键时期Cdx1的表达水平达到高峰,一旦肛门形成其表达量随即开始降低,畸形组与正常组相比较,Cdx1蛋白半定量分析结果 156.9±23.5 vs.102.7±14.4(第14天),165.5±26.2 vs.104.5±14.6(第14.5天),153.6±19.4 vs.76.2±10.7(第15天)。Cdx1 mRNA的表达在第14~15天明显降低差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ETU致畸的大鼠胚胎ARM肛门直肠发育过程中Cdx1/Tcf4的表达存在着时间-空间不均衡性的特点。ETU致畸的大鼠胚胎期泄殖腔/后肠Cdx1/Tcf4表达模式的改变可能引起ARM的发生,Cdx1/Tcf4表达下调可能与ARM的发生有关。