目的分析河北省2004-2008年流感流行期甲3亚型流感病毒流行株对金刚烷胺的耐药情况,为流感的临床治疗用药提供科学依据。方法选取河北省流感监测实验室分离的136株甲3亚型流感病毒,提取病毒核酸,采用RT-PCR扩增流感病毒M2基因片段,纯化产物进行核苷酸序列测定,用生物信息软件分析其与耐药有关的氨基酸位点。结果 136株甲3亚型流感病毒分离株中,128株M2蛋白跨膜区耐药位点的氨基酸被置换,显示对金刚烷胺耐药率为94.12%。128株耐药株中,3株发生了V27A置换,占2.34%,125株发生了S31N置换,占97.66%,在这125株中有5株同时发生了V27I和S31N位点置换,占4.00%,3株同时发生了A29T和S31N位点置换,占2.40%。2004-2008年4个流行期甲3亚型流感病毒耐药率分别为78.95%（30/38）、100.00%（2/2）、100.00%（89/89）和100.00%（7/7）。结论自2005-2006年流感流行期以来,河北省甲3亚型流感病毒流行株对金刚烷胺的耐药率达到100.00%,提示不应该继续使用金刚烷胺类药物预防或治疗流感。